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法医物证学之血清蛋白型.ppt

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法医物证学之血清蛋白型.ppt

第八章,血清蛋白型,概 述,血清的组成 血清型概念 血清型分类 特异性抗体分型同种异型 电泳技术分型电泳多态性,法医学应用的血清蛋白型,HaptoglobinHp Group-specific componentGc TransferrinTf α1-antitrypsinα1-AT ImmunoglobulinIg Low-density lipoproteinLDL, Component等,第一节,结合珠蛋白 Haptoglobin,HP,一、HP的分子结构,糖蛋白,分子式(αβ)2 ,pI4.1 α链有, β 链无多态性 HP1α83个氨基酸,第53位为Lys或Glu,构成HP1αF和HP1αS两条多肽链 HP2α142个氨基酸,第53和112位上或Lys或Glu,构成2F,2S,2FS 三种不同的结构,二、HP的生理功能,与血红蛋白Hb结合成Hp-Hb复合物,并很快被网状内皮系统所清除。 还可以使Hb的过氧化酶活性增高。,三、HP的表现型及遗传,Swithies和Walker(1955)用凝粉凝胶电泳技术,将HP分为三型HP1、HP2-1及HP2。 用尿素将血清变性处理,再用巯基乙醇还原后进行电泳,可检出6种表型,Hp1S-1S、Hp1S-1F、Hp1F-1F、Hp2-1S、Hp2-1F、Hp2-2。由三个共显性等位基因Hp*1F,Hp*1S,Hp*2所控制。 等电聚焦还可进一步分为10余种表型,由5个共显性等位基因控制,四、Hp的遗传变异,HP0型 用常规检测方法不能检出Hp。血液中无HP,亦称无结合珠蛋白血症 HP2-1M型 电泳谱带特点是HP1和HP2谱带中的快泳动带成分比例增多,而其余谱带非常弱。 HPCa型 特征是HP2谱带中快泳动带比例减少,而其余谱带明显增加 HPJ-1型 特点是1谱带分裂为两条带,阴极侧的谱带增多,系HP2-1型的变异型。 HPK-1型 特点是1区的谱带分裂为两条,其余区域无蛋白带,可能有1型演变而来。 其他变异型有HP2-1(Trans),HP2-1(Haw)等,五、HP分型原理、方法,聚丙烯酰胺凝胶电泳(圆盘、垂直板) 原理利用聚丙烯酰胺凝胶(PAG)的分子筛和电场的作用,在凝胶中分离不同型别Hp蛋白。然后利用Hp-Hb复合物中Hb的过氧化物酶活性,使联苯胺氧化成联苯胺蓝。从而使谱带显色进行判型。,第二节 维生素D结合蛋白型,维生素D结合蛋白(vitamin D blindin protein,DPB)又称型特异性成分(group specific component,GC) 属血清α2球蛋白 Hirschfeld于1959年发现其多态性 主要生物学功能是结合和转运维生素D及其代谢产物。GC可在体内或体外与肌动蛋白(actin)结合,形成11的复合物。GC与肌动蛋白结合有利于肌动蛋白从组织中清除。,GC基因定位于第四对染色体长臂(4q12-13) GC系统属常染色体单基因座共显性遗传,按孟德尔定律遗传。 Gc基因全长约42.4kb,包含13个外显子。基因产物为458个氨基酸残基的单一肽链。位于第11外显子中第416位,第420位密码子的变化导致Gc遗传多态性; 常见的等位基因为Gc*2,Gc*1F,Gc*1S。,GC遗传及等位基因,Gc表型,聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳技术可将GC分为三种普通表型,即1、2-1、与2,受控于GC*1与GC*2一对共显性等位基因。 用等电聚焦技术可检出3个等位基因产物,共6种常见亚型。即1F、1F1S、1S、2-1F、2-1S与2,法医学应用评价,个人识别率为0.799 非父排除率为34.8 室温保存4个月的血痕可检出Gc型,免疫球蛋白同种异型遗传标记,同种异型遗传标记是位于免疫球蛋白上具有个体差异的遗传标记,Ig分子免疫学性质,4条多肽链组成并通过二硫键连接的单体,其中两条为重链(H链),两条为轻链(L链) 重链分为5类,IgG(γ)、IgA(α)、IgM(μ)、IgD(δ)、IgE(ε) 轻链可分为两型,κ型和λ型,免疫球蛋白同种异型的命名与遗传,重链(G1m,G2m,G3m,A2m) G1m(1,2,3,17) G2m(23) G3m(5,14,26,6,15,27,10,16, 28,11,21,13,24) A2m(1,2) 轻链(Km) Km (1,2,3) 常染色体共显性、呈单倍型遗传,Gm、Km测定,血凝抑制试验 酶联免疫抑制法,法医学应用评价,Gm、Km系统个人识别率及非父排除率高于已知的红细胞血型、红细胞酶型及其他血清型 Gm、Km抗原在常温下或碱性环境中颇为稳定,溶血对抗原性无大影响 具有较高的法医学应用价值,其他血清型,α1抗胰蛋白酶( α1-AT) 又称蛋白酶抑制物(PI) DP0.625,EPP0.231 转铁蛋白型(Tf) EPP0.15670.1803,

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